Jérôme de Stridon est né vers 347 à Stridon, à la frontière entre la Pannonie et la Dalmatie (actuelle Croatie). À l'âge de 12 ans, il part poursuivre ses études à Rome où il fut baptisé. Il étudie auprès d'Aelius Donat la grammaire, l'astronomie et la littérature païenne, dont Virgile et Cicéron. Nourri de culture antique, mais attiré par la vie contemplative, il fit dans le désert de Chalcis de Syrie l’apprentissage de la vie érémitique. Il est ensuite ordonné prêtre à Antioche.
En 383, le pape Damase Ier le choisit comme secrétaire et lui demande de traduire la Bible en latin. Jérôme, qui parle grec et latin, se rend indispensable par ses traductions et sa connaissance biblique.
Jérôme fait la critique de la cupidité des évêques et des prêtres. De plus il critique le paganisme qui reste présent à Rome au sein du clergé romain, qui y préserve des cultes païens. Les critiques ouvertes de Jérôme contribuent à faire naître une hostilité croissante à son égard de la part du clergé et de ses partisans.
À la mort du pape, il doit quitter Rome et retourne en Terre sainte en compagnie de Paula, noble romaine, pour y mener la vie monastique. À Bethléem, il apprend l'hébreu en suivant les cours du rabbin Bar Anima et étudie à la bibliothèque de Césarée de Palestine les différents écrits d'Origène ainsi que l'Ancien Testament en grec et hébreu.

Durant les 34 dernières années de sa vie, Jérôme se consacre à la composition d'un texte latin de l'ancien et du nouveau Testament tout en y apportant ses commentaires.